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恒遠生物|小鼠T淋巴細胞 CTLL-2 培養攻略


一、細胞基本信息
品牌名稱:  恒遠生物
產品貨號:  HYCC20033
細胞名稱:CTLL-2
中文名稱:小鼠T淋巴細胞
種屬來源:小鼠
組織來源:T細胞
細胞形態:淋巴母細胞樣
生長特性:懸浮生長

二、培養條件
氣相:95%空氣,5%二氧化碳
溫度:37℃

三、培養基與添加物
基礎培養基:RPMI-1640
添加物:10%特級胎牛血清(FBS)、100U/ml(或100IU/ml)IL-2、1%青霉素/鏈霉素(P/S)
注意,有些培養體系可能略有不同,但核心成分通常包括RPMI-1640、FBS和IL-2。

四、細胞培養步驟

1. 細胞復蘇
從液氮罐或-80℃冰箱中取出凍存管,迅速放入37℃水浴中搖晃解凍。
將解凍后的細胞懸液移至含5ml完全培養基的離心管中,1000rpm離心5min。
棄去上清液,補加5mL完全培養基后吹勻,接種于T25培養瓶中(或6cm皿中),培養過夜。
第二天換液并檢查細胞密度。

2. 細胞傳代
當細胞密度達到80%-90%時,進行傳代培養。
離心收集細胞(1000rpm,5-8min),棄去上清液。
補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6mL完全培養基的T25培養瓶中或6cm培養皿中。
對于較難培養的細胞或新手,可采用豎瓶培養法,逐步補加完全培養基,待細胞密度升高后再進行傳代。

3. 細胞凍存
選擇生長狀態良好的細胞進行凍存。
離心收集細胞(1000rpm,5-8min),去除上清液。
按凍存數量加入無血清細胞凍存液,輕輕混勻后,分裝入凍存管中(每管約1mL細胞懸液)。
將凍存管放入-80℃冰箱中過夜,然后轉入液氮罐中儲存。

五、培養注意事項
細胞接收與檢查:收到細胞后,首先檢查細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有異常,請及時與我司(恒遠生物)聯系。
無菌操作:在細胞培養過程中,應嚴格遵守無菌操作規程,避免細胞污染。
細胞密度監控:定期觀察細胞生長情況,及時傳代以避免細胞密度過高導致死亡。
培養基更換:根據細胞生長情況和培養基顏色變化,適時更換新鮮培養基。

六、售后服務與細胞保存
若細胞在運輸或培養過程中出現問題,應及時與我司聯系并提供相關證據(如細胞照片、操作記錄等),以便進行售后處理。細胞應儲存在液氮罐中,避免反復凍融以確保細胞活性。

上海恒遠生物科技有限公司擁有自己的實驗室,備有專業的技術研發團隊,長期致力于各種生物試劑,細胞,血清,ELISA試劑盒的研發與銷售,實驗提供免費代測服務,并提供精湛的技術服務,如果您有實驗上的問題歡迎前來咨詢,為您提供專業的一對一技術指導。 

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