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血清出現(xiàn)沉淀的原因及影響
血清中出現(xiàn)沉淀物是一個(gè)相對(duì)常見的現(xiàn)象，這些沉淀物可能由多種物質(zhì)構(gòu)成，包括但不限于纖維蛋白、膽固醇、脂肪酸酯、蛋白質(zhì)以及磷酸鈣等。以下是對(duì)血清中出現(xiàn)沉淀問題的詳細(xì)分析：
一、血清沉淀物的類型及成因
1.纖維蛋白：纖維蛋白是血清中常見的沉淀物之一，尤其是當(dāng)血清在低溫下收集和快速處理時(shí)，一些纖維蛋白原（可溶性的形成絮狀纖維蛋白的前體）在處理過程中仍處于溶解狀態(tài)。然而，當(dāng)血清經(jīng)過過濾分裝后，這些纖維蛋白原會(huì)在瓶中凝結(jié)，形成肉眼可見的纖維蛋白沉淀。
2.膽固醇、脂肪酸酯及蛋白質(zhì)：這些物質(zhì)在血清中也可能形成沉淀，尤其是在某些特定的條件下。
3.磷酸鈣：磷酸鈣是另一種常見的血清沉淀物，它通常會(huì)使血清出現(xiàn)渾濁的現(xiàn)象，并且在37℃培養(yǎng)時(shí)會(huì)增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點(diǎn)，這些小黑點(diǎn)由于布朗運(yùn)動(dòng)看上去可以活動(dòng)，因此經(jīng)常被誤認(rèn)為是微生物污染。
二、血清沉淀的影響
1.過濾困難：當(dāng)血清中出現(xiàn)大量的沉淀物時(shí)，血清將很難過濾。一般來說，血清在生產(chǎn)后已經(jīng)經(jīng)過嚴(yán)格的過濾處理和無菌檢測，因此不推薦再次過濾用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清。
2.污染誤判：磷酸鈣沉淀往往被誤認(rèn)為是微生物污染，導(dǎo)致研究者可能會(huì)進(jìn)行不必要的無菌試驗(yàn)，從而浪費(fèi)時(shí)間和資源。
三、避免血清沉淀的方法
1.凍結(jié)與解凍：在凍結(jié)血清時(shí)，應(yīng)隨時(shí)搖晃均勻，使溫度及成分均一，以減少沉積的發(fā)作。同時(shí)，應(yīng)避免直接從-20℃直接解凍至37℃，因?yàn)闇囟雀淖兲笕菀仔纬傻鞍踪|(zhì)凝結(jié)而發(fā)作沉積。
2.存儲(chǔ)條件：勿將血清置于37℃太久，否則血清會(huì)變得污濁，且其中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到破壞，從而影響血清的質(zhì)量。此外，長期存放在2~8℃也可能導(dǎo)致沉淀的增加。
3.熱滅活：血清的熱滅活過程十分簡單，但容易形成沉積物的增多。若非必要，可以無須進(jìn)行此過程。若有必要進(jìn)行熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的準(zhǔn)則，并且隨時(shí)搖晃均勻。
綜上所述，血清中出現(xiàn)沉淀物是一個(gè)復(fù)雜的現(xiàn)象，涉及多種物質(zhì)和條件。為了避免和減少沉淀物的產(chǎn)生，需要采取一系列的措施和方法來確保血清的質(zhì)量和穩(wěn)定性。
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